CHO HCP ELISA Kit
Ny fomba ELISA immunosorbent tokana dia ampiasaina amin'ity fitsapana ity.Ireo santionany misy CHOK1 HCP dia miara-mihetsika miaraka amin'ny antibody antibody anti-CHOK1 misy soratra hoe HRP sy antibody anti-CHOK1 voasarona eo amin'ny takelaka ELISA, ary farany dia mamorona komplex sandwich misy antibody-HCP-labeled antibody.Ny antigène-antibody tsy mifatotra dia azo esorina amin'ny fanasana ny takelaka ELISA.Ny substrate TMB dia ampiana amin'ny lavaka fantsakana ho an'ny fanehoan-kevitra ampy.Atsaharo ny fivoaran'ny loko rehefa ampidirina ny vahaolana mijanona, ary ny OD na ny sandan'ny absorbance amin'ny vahaolana fanehoan-kevitra amin'ny 450 / 650nm dia vakiana miaraka amin'ny mpamaky microplate.Ny sandan'ny OD na ny sandan'ny absorbance dia mifandanja amin'ny votoatin'ny HCP ao amin'ny vahaolana.Avy amin'izany, ny fifantohana HCP amin'ny vahaolana dia azo kajy araka ny curve mahazatra.
Fampiharana
Ity kitapo ity dia ampiasaina hamantarana ny votoatin'ny proteinina cellule host CHOK1 amin'ny santionany.
Components
| S/N | singa fototra | fifantohana | Fepetra fitahirizana |
| 1 | CHOK1 HCP Standard | 0,5mg/mL | ≤–20 ℃ |
| 2 | Anti-CHO HCP-HRP | 0,5mg/mL | ≤-20 ℃, miaro amin'ny hazavana |
| 3 | TMB | NA | 2-8 ℃, miaro amin'ny hazavana |
| 4 | 20 × PBST 0,05% | NA | 2-8 ℃ |
| 5 | Atsaharo ny vahaolana | NA | RT |
| 6 | Microplate sealers | NA | RT |
| 7 | BSA | NA | 2-8 ℃ |
| 8 | High adsorption mialoha coating Plates | NA | 2-8 ℃ |
Fitaovana ilaina
| Fitaovana / Fitaovana | fanamboarana | katalaogy |
| Microplate mpamaky | Fitaovana molekiola | Spectra Max M5, M5e, na mitovy aminy |
| Thermomixer | Eppendorf | Eppendorf/5355, na mitovy |
| Vortex mixer | IKA | MS3 Digital, na mitovy |
Fitehirizana sy fahamarinan-toerana
1.Fitaterana amin'ny -25~-15°C.
2.Ny fepetra fitahirizana dia aseho amin'ny tabilao 1;Ny singa 1-2 dia voatahiry ≤–20°C, 5-6 dia voatahiry RT,3,4,7,8 dia voatahiry amin'ny 2-8 ℃;ny fe-potoana manankery dia 12 volana.
Masontsivana vokatra
1.Fahatsapana: 1ng/mL
2.Fahitana isan-karazany: 3-100ng/mL
3.Precision: Intra-assay CV≤ 10%, inter-assay CV≤ 15%
4.Fandrakofana HCP: >80%
5.Specificity: Ity kitapo ity dia manerana izao rehetra izao satria mihetsika manokana amin'ny CHOK1 HCP tsy miankina amin'ny fizotran'ny fanadiovana.
Fiomanana reagent
1.PBST 0.05%
Makà 15 ml 20 × PBST 0,05%, voadio amin'ny ddH2O, ary vita hatramin'ny 300 ml.
2.1.0% BSA
Makà BSA 1g avy ao anaty tavoahangy ary arotsaho ao anaty 100 ml PBST 0,05%, afangaro tsara mandra-pahalevona tanteraka, ary tehirizo ao amin'ny 2-8 ° C.Ny buffer dilution voaomana dia manan-kery mandritra ny 7 andro.Aroso ny manomana araka izay ilaina.
3.Vahaolana fitiliana 2μg/mL
Makà 48μL amin'ny 0.5 mg / mL Anti-CHO HCP-HRP ary arotsaka ao amin'ny 11,952μL amin'ny 1% BSA mba hahazoana vahaolana farany amin'ny 2μg / mL.
4.QC sy fanomanana ny fenitry ny CHOK1 HCP
| Tube Tsia. | tamin'ny fototra | fifantohana | BOKY FAHA- | 1% BSA | Volume total | farany |
| A | Malagasy | 0,5mg/mL | 10 | 490 | 500 | 10.000 |
| B | A | 10.000 | 50 | 450 | 500 | 1.000 |
| S1 | B | 1.000 | 50 | 450 | 500 | 100 |
| S2 | S1 | 100 | 300 | 100 | 400 | 75 |
| S3 | S2 | 75 | 200 | 175 | 375 | 40 |
| S4 | S3 | 40 | 150 | 350 | 500 | 12 |
| S5 | S4 | 12 | 200 | 200 | 400 | 6 |
| S6 | S5 | 6 | 200 | 200 | 400 | 3 |
| NC | NA | NA | NA | 200 | 200 | 0 |
| QC | S1 | 100 | 50 | 200 | 250 | 20 |
Tabilao: Fanomanana ny QC sy ny fenitra
Procedure Assay
1.Omano ny reagents araka ny voalaza ao amin'ny "Reagent Preparation" etsy ambony.
2.Raiso 50μL ny fenitra, ny santionany ary ny QCs (jereo ny tabilao 3) ao anaty lavadrano tsirairay, ary ampio 100μL ny Detection solution (2μg/mL);Apetaho amin'ny sealer ny takelaka ary apetraho eo amin'ny thermomixer ny takelaka ELISA.Atsofohy amin'ny 500rpm, 25±3 ℃ mandritra ny 2 ora.
3.Atsipazo ny microplate ao anaty dobo ary ario ny vahaolana amin'ny coating.Pipette 300μL amin'ny PBST 0,05% ao anaty lavadrano tsirairay mba hanasana ny takelaka ELISA ary ariana ny vahaolana, ary avereno in-3 ny fanasana.Atsofohy amin'ny lamba famaohana madio ny takelaka ary tapaho ho maina.
4.Ampio 100μL amin'ny substrate TMB (jereo ny tabilao 1) isaky ny fantsakana, asio tombo-kase ny takelaka ELISA, ary atsofohy ao anaty haizina amin'ny 25±3 ℃ mandritra ny 15 min.
5.Pipette 100μL ny vahaolana mijanona ao anaty lavadrano tsirairay.
6.Mandrefy absorbance amin'ny halavan'ny onjam 450/650nm amin'ny microplate mpamaky.
7.Fakafakao ny angona avy amin'ny SoftMax na rindrambaiko mitovy.Safidio ny curve manara-penitra amin'ny alàlan'ny fampiasana modely famerenan'ny logistika efatra.
Ohatra Curve Standard
FANAMARIHANA: Raha mihoatra ny fetra ambony amin'ny curve manara-penitra ny fifantohan'ny HCP ao amin'ny santionany, dia tokony hototofana tsara amin'ny buffer dilution alohan'ny hanaovana fitiliana.
-tsoratra
Ny vahaolana fiatoana dia asidra solifara 2M, azafady karakarao tsara mba tsy hiparitaka!
