Rnase Inhibitor (tsy misy glycerol)
Murine RNase inhibitor dia recombinant murine RNase inhibitor naseho sy nodiovina tamin'ny E.coli.Izy io dia mifatotra amin'ny RNase A, B na C amin'ny tahan'ny 1: 1 amin'ny alàlan'ny fatorana tsy covalent, ka manakana ny asan'ny enzymes telo ary miaro ny ARN amin'ny fahasimbana.Na izany aza, tsy mahomby amin'ny RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H na RNase avy amin'ny Aspergillus.Ny inhibitor Murine RNase dia nosedraina tamin'ny RT-PCR, RT-qPCR ary IVT mRNA, ary nifanaraka tamin'ny transcriptase Reverse ara-barotra isan-karazany, polymerase ADN ary polymerase RNA.
Raha ampitahaina amin'ny inhibitors RNase olombelona, ny inhibitor RNase murine dia tsy misy cysteinees roa izay tena saro-pady amin'ny oxidation izay mahatonga ny inactivation ny inhibitor.Izany no mahatonga azy tsy hiorina amin'ny DTT ambany (latsaky ny 1 mM).Ity endri-javatra ity dia mahatonga azy io ho mety amin'ny fampiasana amin'ny fanehoan-kevitra izay misy DTT avo lenta izay manimba ny fanehoan-kevitra (oh: RT-PCR Real-time).
Application
Ity vokatra ity dia azo ampiasaina betsaka amin'ny fanandramana rehetra izay ahafahan'ny fitsabahan'ny RNase hisorohana ny fahasimban'ny RNA, toy ny:
1.First-strand cDNA synthesis, RT-PCR, RT-qPCR, sns.;
2. Arovy ny ARN amin'ny fahapotehan'ny in-vitro transcription/translation (ohatra ny replication viriosy in vitro);
3. Fanakanana ny asan'ny RNase mandritra ny fitokana-monina sy ny fanadiovana RNA.
Fepetra fitahirizana
Tehirizo ao amin'ny -25～-15 ℃;
Ny tsingerin'ny fanalefahana ≤ in-5;
Manan-kery mandritra ny 1 taona.
Famaritana vondrona
Ny singa iray dia faritana ho ny habetsahan'ny RNase Inhibitor ilaina hanakanana ny asan'ny 5 ng RNase A amin'ny 50%.
lanjan'ny molekiola
RNase Inhibitor (tsy misy glycerol) dia proteinina 50 kDa.
Fanaraha-maso ny kalitao
Exonuclease hetsika:
Ny fampidirana anzima 40 U miaraka amin'ny 1 μg λ-Hind III dia mandevona ADN mandritra ny 16 ora amin'ny 37 ° C dia tsy nahitana fahasimbana ny ADN araka ny famaritana ny electrophoresis gel.
Hetsika endonuclease:
Ny fampidirana anzima 40 U miaraka amin'ny ADN 1 μg λ mandritra ny 16 ora amin'ny 37 ° C dia tsy nahitana fahasimbana azo tsapain-tanana ny ADN araka ny famaritana ny electrophoresis gel.
Nicking hetsika:
Ny fampidirana anzima 40 U miaraka amin'ny 1 μg pBR322 mandritra ny 16 ora amin'ny 37 ℃ dia tsy nahitana fahasimbana ny ADN araka ny famaritana ny gel electrophoresis.
RNase asa:
Ny fampidirana anzima 40 U miaraka amin'ny RNA MS2 1.6 μg mandritra ny 4 ora amin'ny 37 ℃ dia tsy nahitana fahasimbana azo tsapain-tanana ny ARN araka ny famaritana ny electrophoresis gel.
E.ADN coli:
40 U an'ny Enzyme dia hitan'ny TaqMan qPCR.Ny ADN E.coli dia ≤ 0. 1pg/40U.
Notes
1. Aza mihozongozona na mihetsiketsika mafy mba hisorohana ny tsy fihetsehan'ny enzyme.
2. RNase inhibitor dia mavitrika amin'ny mari-pana manomboka amin'ny 25 ℃ ka hatramin'ny 55 ℃ ary tsy mihetsika amin'ny ≥65 ℃.
3. Ny asan'ny RNase H, RNase 1, ary RNase T1 dia tsy voasakana.
4. Ny isan'ny pH hanakanana ny hetsika RNase dia malalaka (mavitrika amin'ny pH 5-9), mampiseho hetsika ambony indrindra amin'ny pH 7-8.
