Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Description
Ampahany : HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix dia kitapo PCR maromaro mifototra amin'ny RNA ho maodely.Ao amin'ny fanandramana, ny fandikana mivadika sy ny PCR quantitative dia atao amin'ny fantsona fanehoan-kevitra mitovy, manatsotra ny asa andrana ary mampihena ny mety hisian'ny loto.Ny endrika tsy manam-paharoa amin'ny buffer sy ny fangaro anzima dia azo ampiasaina amin'ny rafitra lyophilized dingana iray.Ny kitapo dia mampiasa Reverse Transcriptase mahatohitra hafanana ho an'ny synthesis mahomby amin'ny cDNA tady voalohany amin'ny fampiasana Hotstart Taq DNA Polymerase ho an'ny fanamafisana fatra.Ahitana buffer fanehoan-kevitra optimized, fifangaroan'ny enzymes sns., ary ny anton-javatra izay manakana amin'ny fomba mahomby ny fanamafisam-peo PCR tsy voafaritra ary manatsara ny fahombiazan'ny fanamafisam-peo amin'ny fanehoan-kevitra qPCR marobe dia nampiana, izay ahafahana manatsara ny fatran'ny fluorescence marobe ary miantoka ny fahombiazan'ny primers.
singa
| Anarana |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-enzyme Mix |
| 3. Lyo mpiaro |
Fepetra fitateranaion
A: Lyo-buffer sy mpiaro: -25 ~ -15 ℃, fiainana talantalana dia 1 taona.
B: Lyo-enzyme mix, 2-8 ℃, ny fiainana talantalana dia 6 volana.
Torolàlana ho an'ny fandidiana
1. Reaction System (Raiso ohatra ny 25μL)
| singa | Vola (μL) | Fifantohana farany |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Lyo-enzyme Mix | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Fangaro voalohany (10μM) | 1 | 0.1-1uM |
| Probe Mix (10μM) | 0.5 | 0,05-0,5uM |
| RNA Template | 5 | - |
| DEPC H2O | Hatramin'ny 25 | - |
2. Optimized Cycling Protocol
1) Protocol amin'ny bisikileta mahazatra
| Dingana fanehoan-kevitra | hafanana | Time | tsingerin'ny | |
| 1 | Mivadika transcription | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Denaturation voalohany | 95°C | 5min | 1 |
| 3 | fanehoan-kevitra amplification | 95°C | 15 seg | 45 tsingerina |
| 60°Cb | 30 segc |
2) Protocol amin'ny bisikileta haingana
|
| Dingana fanehoan-kevitra | hafanana | Time | tsingerin'ny |
| 1 | Mivadika transcription | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Denaturation voalohany | 95°C | 2sec | 1 |
| 3 | fanehoan-kevitra amplification | 95°C | 1sec |
45 tsingerina |
| 60°Cb | 13 segc |
Fanamarihana:
a) Reverse fandikana: Afaka misafidy 42°C na 50°C mandritra ny 10-15 minitra ny maripana.
b) fanehoan-kevitra amplification: Ny maripana dia amboarina araka ny sandan'ny Tm amin'ireo voalohany natao.
c)Fluorescence famantarana fahazoana: Azafady apetraho ny fomba fanandramana araka ny fepetra takian'nyboky fampianarana.
Fampahalalana ara-teknika/famaritana
| Manomboka mafana | Naorina-in mafana fanombohana |
| Fomba fitadiavana | Famantarana ny primer-probe |
| PCR fomba | Dingana iray RT-qPCR |
| Karazana santionany | ARN |
-tsoratra
1. Ity vokatra ity dia natao ho an'ny fikarohana ihany.
2. Azafady, mitafy PPE ilaina, akanjo laboratoara sy fonon-tanana, mba hiantohana ny fahasalamanao sy ny fiarovana anao！
