Ultra Nuclease GMP-kilasy
Saka No: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade dia naseho sy nodiovina tao amin'ny Escherichia coli (E.coli) tamin'ny alàlan'ny génétique sy nomanina teo ambanin'ny tontolo GMP.Afaka mampihena ny viscosity ny sela supernatant sy ny sela lysate amin'ny fikarohana siantifika, mampitombo ny fahombiazan'ny fanadiovana proteinina ary manatsara ny fikarohana asa proteinina.Ny vokatra koa dia afaka mampihena ny sisa tavela amin'ny asidra nokleika ho an'ny pg-grade, manatsara ny fahombiazan'ny vokatra biolojika amin'ny fampiharana, anisan'izany ny fanadiovana virosy, ny famokarana vaksiny, ary ny famokarana fanafody proteinina / polysaccharide.Ankoatra izany, ny vokatra dia azo ampiharina ihany koa mba hisorohana ny clumping ny olombelona peripheral ra mononuclear sela (PBMC) amin'ny fitsaboana sela sy ny fampandrosoana ny vaksiny.
Ny UltraNuclease dia omena amin'ny endrika reagent sterilized, eluted amin'ny buffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), miaraka amin'ny endrika ranon-javatra tsy misy loko sy mangarahara.Ity vokatra ity dia novokarin'ny fepetra GMP ary omena amin'ny endrika ranon-javatra.
singa
UltraNuclease GMP-kilasy (250 U/μL)
Fepetra fitahirizana
Ny vokatra dia alefa amin'ny ranomandry maina ary azo tehirizina amin'ny -25 ℃ ~ -15 ° C mandritra ny roa taona.
Raha misokatra ny vokatra ary voatahiry ao amin'ny 4 ℃ mandritra ny herinandro mahery, dia manoro hevitra ny sivanany vokatra mba hisorohana ny fandotoana mikraoba.
fepetra arahana
| Expression Host | Recombinant E. coli miaraka amin'ny fototarazo UltraNuclease |
| Lanja molekiola | 26,5 kDa |
| teboka soelectric | 6.85 |
| fahadiovana | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Storage Buffer | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, glycérine 50% |
|
Famaritana vondrona | Ny famaritana ny singa iray (U) dia ny habetsahan'ny enzyme ampiasainaovay 1.0 amin'ny 30 minitra ny sandan'ny absorption an'ny ΔA260 amin'ny 2. 625 mLrafitra fanehoan-kevitra amin'ny 37 ℃ miaraka amin'ny pH 8,0 (mitovy amin'ny fandevonan-kanina tanteraka ny37 μg ADN tsirinaina salmon ho oligonucleotides). |
torolalana
1. Santionany famoriam-bola
Ny sela miraikitra: esory ny fitaovana, sasao amin'ny PBS ny sela, ary esory ny supernatant.
Ny sela fampiatoana: manangona ny sela amin'ny centrifugation, manasa ny sela amin'ny PBS, centrifuge amin'ny 6,000rpm mandritra ny 10 minitra, manangona ny pellet.
Escherichia coli: manangona ny bakteria amin'ny centrifugation, sasao indray mandeha amin'ny PBS, centrifuge amin'ny 8,000rpm mandritra ny 5 minitra, ary manangona ny pellet.
2. Santionany fitsaboana
Karakarao ireo pellet cellule voaangona miaraka amin'ny buffer lysis amin'ny tahan'ny faobe (g) amin'ny volume (mL) 1: (10-20), na amin'ny fomba mekanika na simika amin'ny ranomandry na amin'ny mari-pana (1g ny pellet sela misy eo amin'ny
109 sela).
3. Fitsaboana Enzyme
Ampio 1-5mM MgCl amin'ny rafitra fanehoan-kevitra ary amboary ny pH ho 8-9.
Ampio UltraNuclease araka ny tahan'ny 250 Units handevona 1 g ny sela sela, incubate amin'ny 37 ℃ mihoatra ny 30 minitra.Azafady, jereo ny endrika "Fotoam-pihetsiketsehana soso-kevitra" hisafidianana nyfaharetan'ny fitsaboana.
4. Supernatant famoriam-bola
Centrifuge amin'ny 12.000 rpm mandritra ny 30 minitra ary manangona ny supernatant.
Fanamarihana: Raha asidra na alkaline ny vahaolana, na misy sira be dia be, savony, nadenaturants, azafady ampitomboy ny fatran'ny enzyme na hanitatra ny fotoana fitsaboana mifanaraka amin'izany.
Recommended reaction conditions
| fikirana | Toetra tsara indrindra | Toetra mahomby |
| Mg²+Concentration | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| hafanana | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| DTT fifantohana | 0-100 mM | >0 mM |
| Mercaptoethanol Concentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalent Cation Concentration | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Phosphate lon fifantohana | 0-10 mM | 0-100 mM |
soso-kevitra fanehoan-kevitra Time (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Habetsan'ny UltraNuclease (Fifantohana farany) | Fotoana fanehoan-kevitra |
| 0,25 U/mL | >10 h |
| 2.5 U/mL | >4h |
| 25 U/mL | 30 min |
Fanamarihana:
Azafady, ataovy ny PPE ilaina, akanjo laboratoara sy fonon-tanana, mba hiantohana ny fahasalamanao sy ny fiarovana anao!
