DNase I (Rnase Free)(5u/ul)
Saka No: HC4007A
DNase I (Deoxyribonuclease I) dia endodeoxyribonuclease izay afaka mandevona ADN tokana na roa.Izy io dia manaiky sy manapaka ny fifamatorana phosphodiester mba hamokarana monodeoxynucleotides na oligodeoxynucleotides tokana na roa miaraka amin'ny vondrona phosphate amin'ny terminal 5' sy hydroxyl amin'ny terminal 3'.Ny asan'ny DNase I dia miankina amin'ny Ca2+ary azo ampiasaina amin'ny ion metaly divalent toy ny Mn2+ary Zn2+.5 mM Ca2+miaro ny enzyme amin'ny hydrolysis.Eo anatrehan'i Mg2+, ny anzima dia afaka mamantatra kisendrasendra sy manapaka toerana rehetra amin'ny tadin'ny ADN rehetra.Eo anatrehan’i Mn2+, ny tady roa amin'ny ADN dia azo fantarina miaraka ary zaraina amin'ny toerana iray ihany mba hamorona sombiny ADN amin'ny farany na sombintsombiny ADN amin'ny farany mipetaka miaraka amin'ny nucleotides 1-2 mipoitra.
singa
Anarana | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
DNase I, tsy misy RNase | 20μL | 200μL | 1mL | 10 mL |
10 × DNase I Buffer | 1mL | 1mL | 5 × 1ml | 5 × 10 mL |
Fepetra fitahirizana
-25 ℃ ~ -15 ℃ ho fitehirizana;Fitaterana ambanin'ny ranomandry.
torolalana
1. Omano ny vahaolana amin'ny fanehoan-kevitra ao amin'ny fantsona tsy misy RNase araka ny ampahany voatanisa etsy ambany:
singa fototra | BOKY FAHA- |
ARN | X µg |
10 × DNase I Buffer | 1μL |
DNase I, tsy misy RNase(5U/μL) | 1 U isaky ny µg RNA① |
ddH2O | Hatramin'ny 10μL |
Fanamarihana: ①Kajio ny habetsaky ny DNase I izay mila ampiana arakaraka ny habetsahan'ny ARN.
2. 37 ℃ mandritra ny 15 minitra;
3. Ampio 0.5M EDTA amin'ny fifantohana farany amin'ny 2.5mM ~ 5mM, ary hafanana amin'ny 65 ℃ mandritra ny 10 minitra mba hampitsaharana ny fanehoan-kevitra.Ny santionany dia azo ampiasaina mivantana amin'ny fanehoan-kevitra manaraka toy ny transcription mivadikafanandramana.
Famaritana vondrona
Ny singa iray dia voafaritra ho ny habetsahan'ny anzima izay manimba tanteraka ny 1µg pBR322ADN ao anatin'ny 10 minitra amin'ny 37 ℃.
Fanaraha-maso kalitao
RNase:5U an'ny DNase I miaraka amin'ny 1.6µg MS2 RNA mandritra ny 4 ora amin'ny 37 ℃ dia tsy miteraka fahasimbana satriavoafaritry ny electrophoresis gel agarose.
-tsoratra
1. Mba omano irery ny 0.5MEDTA.
2. Ampiasao ny 1U DNase I isaky ny µg an'ny ARN.Na izany aza, raha latsaky ny 1µg ny ARN dia ampiasao azafady 1U DNase I.
3. Apetraho eo ambony ranomandry ny enzyme mandritra ny fandidiana.