2×HiF Taq miampy Master Mix
Saka No: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (miaraka amin'ny loko) dia vahaolana 2×premixed efa vonona misy HIF ADN Polymerase, dNTP, ary buffer optimized.Ny antibody monoclonal roa amin'ny mari-pana amin'ny efitrano izay manakana ny hetsika polymerase sy ny hetsika 3′→5′exonuclease dia ampiana amin'ny fifangaroana master ho an'ny Hot Start PCR mora sy voafaritra tsara.Ny anton-javatra fanitarana dia ampiana amin'ny fifangaroan'ny master mba hanomezana fahafahan'ny fampitomboana ampahany lava ny anzima, ny halavan'ny amplification dia mety ho hatramin'ny 13 kb, ny enzyme dia manana hetsika polymerase ADN 5′→3′ ary 3′→5′. exonuclease, ny fahatokiany dia 83 heny noho ny Taq DNA polymerase, izay in-9 ny an'ny polymerase ADN mahazatra.Mety amin'ny fanamafisam-peo sarotra, ny vokatra fanamafisam-peo dia faran'ny blunt.
2×HIF Taq plus Master Mix (miaraka amin'ny loko) dia manana tombony amin'ny haingana sy mora, ny fahatsapana avo lenta, ny fanamafisana matanjaka, ny fahamarinan-toerana tsara, sns. dingana protocol, manatsotra ny dingana andrana sy mitahiry fotoana.Ity vokatra ity dia misy loko famantarana electrophoresis, ary ny vokatra PCR dia azo ampiasaina mivantana amin'ny electrophoresis.Ankoatr'izay, ny vokatra dia misy mpiaro manokana ihany koa, mba hahafahan'ny fifangaroan'ny master hihazona ny hetsika marin-toerana aorian'ny fanamainana miverimberina.
Fepetra fitahirizana
Ny vokatra dia tokony hotehirizina amin'ny -25 ~ -15 ℃ mandritra ny 1 taona.
fepetra arahana
| Famaritana ny vokatra | Master Mix |
| fifantohana | 2× |
| Manomboka mafana | Naorina-in Hot Start |
| Overhang | tapa-doha |
| Hafainganam-pandrenesana | Rapid |
| Habe (vokatra farany) | Hatramin'ny 13 kb |
| Fepetra momba ny fitaterana | gilasy maina |
| Karazana vokatra | PCR premixes avo lenta |
torolalana
1.PCR Reaction System
| singa | Vola (μL) |
| ADN Template | mety |
| Voalohany aloha (10 μmol/L) | 2.5 |
| Primer mivadika (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq miampy Master Mix | 25 |
| ddH2O | ny 50 |
2.Fampiasana modely samihafa
| Karazana môdely | Ampitomboy ny sombiny manomboka amin'ny 1kb ka hatramin'ny 10 kb |
| ADN génomika | 50ng-200 ng |
| Plasmid na ADN viral | 10pg-20ng |
| cDNA | 1-2.5 µL (Aza mihoatra ny 10% amin'ny habetsaky ny fanehoan-kevitra PCR farany) |
3.Amplification Protocol
1) Protocol dingana roa (môdely sarotra)
| Dingana tsingerina | Temp. | Time | tsingerina |
| Denaturation voalohany | 98 ℃ | 3 min | 1 |
| Denaturation | 98 ℃ | 10 seg | 30-35 |
| Fanitarana | 68 ℃ | 30 seg/kb | |
| Fanitarana farany | 72 ℃ | 5 min | 1 |
2) Protocol telo dingana (protocol mahazatra)
| Dingana tsingerina | Temp. | Time | tsingerina |
| Denaturation voalohany | 98 ℃ | 3 min | 1 |
| Denaturation | 98 ℃ | 10 seg | 30-35 |
| Fanafody | 60 ℃ | 20 seg | |
| Fanitarana | 72 ℃ | 30 seg/kb | |
| Fanitarana farany | 72 ℃ | 5 min | 1 |
3) Protocol Gradient Annealing (môdely sarotra)
| Dingana tsingerina | hafanana | Time | tsingerina |
| Denaturation voalohany | 98 ℃ | 3 min | 1 |
| Denaturation | 98 ℃ | 10 seg | 15 (1 ℃ fampihenana isaky ny tsingerina) |
| Fametahana gradient | 70-55 ℃ | 20 seg | |
| Fanitarana | 72 ℃ | 30 seg/kb | |
| Denaturation | 98 ℃ | 10 seg |
20 |
| Fanafody | 55 ℃ | 20 seg | |
| Fanitarana | 72 ℃ | 30 seg/kb | |
| Fanitarana farany | 72 ℃ | 5 min | 1 |
Endri-javatra eo ambanin'ny protocol amplification samihafa
| Protocol | dingana roa- | dingana telo- | Fametahana gradient |
| Spec. | fifadian-kanina | SALASALANY | MORA |
| manokana | avo | SALASALANY | avo |
| PCR vokatra | SALASALANY | avo | SALASALANY |
| Taham-pikarohana | avo | SALASALANY | avo |
-tsoratra
Azafady, ataovy ny PPE ilaina, akanjo laboratoara sy fonon-tanana, mba hiantohana ny fahasalamanao sy ny fiarovanao!
