Rnase A
Ribonuclease A(RNaseA) dia polypeptide tokana misy tady disulfide 4 miaraka amin'ny lanjan'ny molekiola manodidina ny 13.7 kDa.RNase A dia endoribonuclease izay manimba manokana ny ARN tokana amin'ny sisa tavela C sy U.Amin'ny ankapobeny, ny cleavage dia manaiky ny fifamatorana phosphodiester noforonin'ny 5'-ribose amin'ny nucleotide sy ny vondrona phosphate amin'ny 3'-ribose amin'ny nucleotide pyrimidine mifanakaiky, ka ny 2,3'-cyclic phosphates dia hydrolyzed amin'ny 3 mifanaraka amin'izany. 'phosphates nucleoside (ohatra, pG-pG-pC-pA-pG dia notapatapahin'ny RNase A mba hiteraka pG-pG-pCp sy A-PG).Ny RNase A no mavitrika indrindra amin'ny famafazana RNA tokana.Ny fifantohana miasa atolotra dia 1- 100 μG / mL, mifanaraka amin'ny rafitra fanehoan-kevitra isan-karazany.Ny fatran'ny sira ambany (0-100 mM NaCl) dia azo ampiasaina hanapahana ny RNA tokana, RNA roa, ary ny rojo RNA noforonin'ny hybridization RNA-ADN.
Na izany aza, amin'ny fatran'ny sira ambony (≥0.3 M), ny RNase A dia manapaka manokana ny ARN tokana.
Ny RNase A dia matetika ampiasaina hanesorana ny ARN mandritra ny fanomanana ny ADN plasmid na ADN génomika.Na mavitrika na tsia ny DNase mandritra ny dingana fanomanana dia mety hisy fiantraikany mora amin'ny fanehoan-kevitra.Ny fomba nentim-paharazana amin'ny fandrahoan-drano ao anaty rano fandroana dia azo ampiasaina hanesorana ny hetsika DNase.Ity vokatra ity dia tsy misy DNase sy protease, ary tsy mila fitsaboana hafanana alohan'ny fampiasana azy.Ankoatr'izay, ity vokatra ity dia azo ampiasaina amin'ny andrana biolojia molekiola toy ny famakafakana ny fiarovana ny RNase sy ny famakafakana ny filaharan'ny RNA.
Fepetra fitahirizana
Ny vokatra dia tokony hotehirizina amin'ny -25 ℃ ~ - 15 ℃ mandritra ny 2 taona.
fepetra arahana
Bika Aman 'endrika | vovoka |
Quantity | 100mg / 1g |
Karazana vokatra | RNase A |
torolalana
Io no iray amin'ireo fomba mahazatra amin'ny fanomanana vahaolana fitahirizana RNase A.Azo omanina koa izanyamin'ny fomba hafa araka ny fomba nentim-paharazana ao amin'ny laboratoara na literatiora reference (toy nylevona mivantana amin'ny 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 na vahaolana Tris-NaCl)
1. Mampiasà 10 mM sodium acetate (pH 5.2) hanomanana 10 mg/mL amin'ny RNase A vahaolana fitehirizana.
2. Fafana amin'ny 100 ℃ mandritra ny 15 min.
3. Mangatsiaka amin'ny mari-pana ao amin'ny efitrano, ampio 1/10 volume amin'ny 1 M Tris-HCl (pH 7.4), amboary ny pH azy ho 7.4 (ho an'nyOhatra, ampio 500 mL ny 10 mg/mL RNase fitehirizana vahaolana 1 M Tris-HCl, pH7.4).
4. Sub-packaged amin'ny -20 ℃ ho an'ny fitahirizana mangatsiaka, izay mety maharitra hatramin'ny 2 taona.
[Fanamarihana]:
Rehefa mangotraka ny vahaolana RNaseA amin'ny toe-javatra tsy miandany, dia hiforona ny rotsak'orana RNase;Andrahoina amin'ny pH ambany, ary raha misy rotsak'orana dia azo jerena, izay mety ho vokatry ny fisian'ny loto proteinina.Raha misy antsanga hita rehefa avy mangotraka, dia azo esorina amin'ny alalan'ny centrifugation haingam-pandeha (13000rpm) ny loto, ary avy eo dia fenoina ho fitehirizana mangatsiaka.
-tsoratra
Azafady, ataovy ny PPE ilaina, toy ny akanjo laboratoara sy fonon-tanana, mba hiantohana ny fahasalamanao sy ny fiarovana anao.