Dingana iray RT-qPCR SYBR Green Premix
Saka No: HCB5140A
Dingana iray RT-qPCR Syber Green Premix dia natao ho an'ny fandrefesana fluorescence mifototra amin'ny loko SYBR Green I.Amin'ny fampiasana primer manokana momba ny fototarazo, ny transcription mivadika ary ny fanehoan-kevitra qPCR dia vita ao anaty fantsona iray, manafoana ny filàna fanokafana kapila miverimberina sy fandidiana pipetting, manatsara ny fahombiazan'ny assay ary mampihena ny mety hisian'ny loto.Ho an'ny santionany RNA, ny kitapo dia mampiasa Reverse Transcriptase mahatohitra hafanana ho an'ny synthesis cDNA mahomby ary HotStart Taq DNA Polymerase ho an'ny fanamafisam-peo.Eo ambanin'ny rafitra buffer optimized, ny fahatsapan'ny kitapo dia mety ho avo indrindra amin'ny 0.1 pg ho an'ny tanjona avo lenta ary avo indrindra amin'ny 1 pg ho an'ny tanjona voafaritra tsara.Ny kitapo dia mety amin'ny fanamafisana sy famatsiana ny santionany ADN.Izy io dia ahafahana mamantatra sy manombatombana ny asidra nokleika avy amin'ny santionan'ny zavamaniry sy biby, sela ary zavamiaina bitika.
singa
| No | Anarana | BOKY FAHA- | BOKY FAHA- |
| 1 | Advanced Buffer | 250 μL | 2×1,25 mL |
| 2 | Advanced Enzyme Mix | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Free H2O | 250 μL | 2×1,25 mL |
Fepetra fitahirizana
Ity vokatra ity dia tokony hotehirizina amin'ny -25 ~ -15 ℃ lavitra ny hazavana mandritra ny 1 taona.
torolalana
1.Fametrahana rafitra fanehoan-kevitrad
| singa | Vola (μL) | Vola (μL) | fifantohana farany |
| Advanced Buffer | 12.5 | 25 | 1× |
| Advanced Enzyme Mix | 1 | 2 | - |
| Primer mandroso (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Primer mivadika (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase Free H2Oc | ho 25 | ny 50 | - |
Fanamarihana:
1) a.TNy fifantohana voalohany farany dia 0.2 μmol/L, izay azo amboarina ihany koa eo anelanelan'ny 0.1 sy 1μmol/L raha mety.
2) b.Ny reagent dia tena saro-pady, miaraka amin'ny totalin'ny RNA ao anatin'ny 1pg-1μg, ary ny fitsapana ny santionan'ny olombelona dia nampiseho fampidirana tsara indrindra amin'ny 1 pg-100 ng, mifehy ny sanda Ct amin'ny ankapobeny amin'ny 15-30 araka izay azo atao.
3) c.Amporisihina ny mampiasa 20μL na 50μL mba hiantohana ny fahamendrehana sy ny reproducibility ny fanamafisana ny fototarazo kendrena.
4) d.Miomàna ao amin'ny dabilio tena madio ary ampiasao ny toro-hevitra tsy misy sisa tavela amin'ny nuclease sy ny fantsona fanehoan-kevitra;toro-hevitra amin'ny cartridges sivana no soso-kevitra.Fadio ny fandotoana miampita sy ny fandotoana aerosol.
2.Programa fanehoan-kevitra
| Dingana tsingerina | Temp. | Time | tsingerina |
| Mivadika transcription | 50 ℃a | 6 mn | 1 |
| Denaturation voalohany | 95 ℃ | 5 mn | 1 |
| fanehoan-kevitra amplification | 95 ℃ | 15 seg | 40 |
| 60 ℃b | 30 seg | ||
| Dingan'ny curve mitsonika | Default fitaovana | 1 | |
Fanamarihana:
1) a.Ny hafanan'ny transcription mivadika dia azo fidina eo anelanelan'ny 50-55°C araka ny filana andrana.Ho an'ny santionany ADN dia azo esorina ny fizotran'ny fandikana mivadika.
2) b.Amin'ny toe-javatra manokana, ny mari-pana annealing / fanitarana dia azo ahitsy araka ny sanda Tm primer, 60 ° C no soso-kevitra.
-tsoratra
1. Ity vokatra ity dia natao ho an'ny fikarohana ihany.
2. Azafady, miasa miaraka amin'ny palitao laboratoara sy fonon-tanana fanariana, ho fiarovana anao.
