Universal SYBR GREEN qPCR Premix (manga)

Ampahany : HCB5041B

Universal Blue qPCR Master Mix (Dye Based) dia vahaolana mialoha ho an'ny fanamafisam-peo PCR 2 × tena misy amin'ny alàlan'ny fahatsapan-tena sy ny maha-tokana azy, ny loko manga, ary misy fiantraikany amin'ny fanaraha-maso fanampiny.Ny singa fototra Taq DNA polymerase dia mampiasa fanombohana mafana antibody mba hanakanana amin'ny fomba mahomby ny fanamafisana tsy voafaritra noho ny fanalana voalohany mandritra ny fanomanana santionany.Amin'izany fotoana izany, ny raikipohy dia manampy ireo anton-javatra mampiroborobo mba hanatsarana ny fahombiazan'ny fanamafisana ny PCR fanehoan-kevitra sy ny fampitoviana ny fampitomboana ny fototarazo amin'ny atiny GC samihafa (30 ~ 70%), mba hahafahan'ny PCR quantitative mahazo fifandraisana tsara amin'ny habeny midadasika. faritra.Ity vokatra ity dia misy ROX Passive Reference Dye manokana, izay azo ampiharina amin'ny ankamaroan'ny fitaovana qPCR.Tsy ilaina ny manitsy ny fifantohana amin'ny ROX amin'ny fitaovana samihafa.Ilaina fotsiny ny manampy primers sy môdely hanomanana ny rafitra fanehoan-kevitra amin'ny fanamafisana.

singa

Universal Blue qPCR Master Mix

Fepetra fitahirizana

Ny vokatra dia alefa miaraka amin'ny fonosana gilasy ary azo tehirizina amin'ny -25 ℃ ~ -15 ℃ mandritra ny 18 volana.Ilaina ny misoroka ny taratra hazavana matanjaka rehefa mitahiry na manomana ny rafitra fanehoan-kevitra.

famaritana

torolalana

1.Reaction System

[Fanamarihana]: Afangaro tsara alohan'ny hampiasana mba hisorohana ny bubbles be loatra amin'ny fihovitrovitra mafy.

a) Primer fifantohana: Ny farany primer fifantohana dia 0.2μmol/L, ary azo ahitsy ihany koa eo amin'ny 0.1 sy 1.0μmol/L araka izay mety.

b) Fifantohan'ny maodely: Raha vahaolana tahiry cDNA tsy voadio ilay môdely, dia tsy tokony hihoatra ny 1/10 amin'ny totalin'ny fihetsiketsehana qPCR ny vola ampiasaina.

c) Fandotoana ny maodely: Amporisihina ny manalefaka in-5-10 ny vahaolana tahiry cDNA.Ny habetsahan'ny môdely tsara indrindra ampiana dia tsara kokoa raha ny sandan'ny Ct azo amin'ny amplification dia 20-30 cycles.

d) Rafitra fanehoan-kevitra: soso-kevitra ny mampiasa 20μL na 50μL mba hiantohana ny fahombiazany sy ny famerenana ny fanamafisana ny fototarazo kendrena.

e) Fiomanana rafitra: Miomàna ao amin'ny dabilio tena madio ary ampiasao ny toro-hevitra sy ny fantsona fanehoan-kevitra tsy misy sisa tavela amin'ny nuclease;izany no nanolorana azy ho mampiasa ny toro-hevitra amin`ny sivana cartridges.Fadio ny fandotoana miampita sy ny fandotoana aerosol.

2.Programa fanehoan-kevitra

Programa manara-penitra

Fandaharana haingana

[Fanamarihana]: Ny programa haingana dia mety amin'ny ankamaroan'ny fototarazo, ary ny programa mahazatra dia azo andramana ho an'ny fototarazon'ny rafitra faharoa sarotra.

a) Ny mari-pana sy ny fotoana fanalefahana: azafady amboary araka ny halavan'ny fototarazo sy ny fototarazo kendrena.

b) Fitrandrahana famantarana ny fluorescence (★): Apetraho azafady ny fomba fanandramana araka ny fepetra takiana amin'ny torolàlana momba ny fampiasana ny fitaovana.

c) Curve mitsonika: Azo ampiasaina amin'ny fomba mahazatra ny programa default.

3. Famakafakana vokatra 

Replika biolojika telo farafahakeliny no takiana amin'ny andrana fatra.Aorian'ny fanehoan-kevitra dia mila voamarina ny curve amplification sy ny curve mitsonika.

3.1 Curve fanamafisam-peo:

Ny curve fanamafisam-peo mahazatra dia miendrika S.Ny famakafakana quantitative dia marina indrindra rehefa latsaka eo anelanelan'ny 20 sy 30 ny sanda Ct. Raha latsaky ny 10 ny sanda Ct, dia ilaina ny manalefaka ny môdely ary manatanteraka ny fitsapana indray.Rehefa eo anelanelan'ny 30-35 ny sandan'ny Ct dia ilaina ny mampitombo ny fifantohan'ny môdely na ny habetsahan'ny rafitra fanehoan-kevitra, mba hanatsarana ny fahombiazan'ny amplification ary hiantohana ny fahamarinan'ny famakafakana vokatra.Raha mihoatra ny 35 ny sandan'ny Ct, dia tsy afaka mamakafaka ny fanehoana ny fototarazo ny valin'ny fitsapana, fa azo ampiasaina amin'ny famakafakana qualitative.

3.2 Curve mitsonika:

Ny tendrony tokana amin'ny curve mitsonika dia manondro fa ny specificity fanehoan-kevitra dia tsara ary azo atao ny famakafakana quantitative;raha toa ka mampiseho avo roa heny na maromaro ny curve mirendrika dia tsy azo atao ny famakafakana quantitative.Ny curve mitsonika dia mampiseho tampon'isa roa, ary ilaina ny mitsara raha ny tampony tsy tanjona dia dimer primer na fanamafisana tsy voafaritra amin'ny alàlan'ny ADN agarose gel electrophoresis.Raha dimer primer izy io, dia soso-kevitra ny hampihenana ny fifantohana voalohany na ny fanavaozana ny primer miaraka amin'ny fahombiazan'ny amplification avo lenta.Raha fanamafisam-peo tsy voafaritra dia ampitomboy azafady ny mari-pana fanalana, na amboary ny primer amin'ny maha-tokana azy.

-tsoratra

Azafady, ataovy ny PPE ilaina, akanjo laboratoara sy fonon-tanana, mba hiantohana ny fahasalamanao sy ny fiarovanao!

Ity vokatra ity dia natao ho an'ny fikarohana IHANY!